- 栏目:试验研究
- 作者:彭婷，刘曼，刘春宇，王家发，田树娟，袁黎
- 关键词:西瓜；CRISPR/Cas9；愈伤组织；编辑效率检测
- DOI:10.16861/j.cnki.zggc.20230510.003
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摘 要：西瓜作为重要的园艺经济作物，其CRISPR/Cas9基因编辑效率的快速检测方法仍十分匮乏。以愈伤组织再生能力强的野生西瓜种质ZTC 为试验材料，针对西瓜ClPDS基因构建CRISPR/Cas9双靶点敲除载体，利用农杆菌侵染西瓜幼嫩子叶，在含1.0 mg·L-1 2，4-二氯苯氧乙酸生长素的MS 培养基中诱导愈伤组织形成，通过绿色荧光蛋白标记筛选阳性愈伤组织，检测其编辑效率。结果表明，2个靶点均发生基因编辑，靶点1处的编辑效率为42.95%，靶点2 处的编辑效率为29.92%。在愈伤组织中建立了西瓜生长发育早期有效基因编辑效率检测体系，为后续编辑株系的确定节约了大量时间，为基因编辑技术应用于西瓜重要农艺性状改良及优异种质创制提供了技术支撑。