- 栏目:试验研究
- 作者:朱蕾
- 关键词:甜瓜；CRISPR/Cas9；发根农杆菌；基因敲除
- DOI:10.16861/j.cnki.zggc.202423.0786
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摘 要：选取甜瓜栽培材料龙庆八号作为受体材料，构建 CmCURT1A 基因 CRISPR/Cas9 基因编辑载体，经发根农杆菌介导检测靶位点的编辑情况，为后续甜瓜遗传转化试验提供载体基础。以甜瓜 CmCURT1A 基因（ID：MELO3C006053.2）为靶基因构建双靶位点敲除载体，经发根农杆菌 K599 介导的简单遗传转化技术使甜瓜组织长出不定根，经 PCR 测序发现在不定根中分别存在 65 bp、72 bp 不同碱基片段的缺失。该方法成功进行了甜瓜 CRISPR/Cas9 载体靶位点敲除情况的检测，简单高效，实现了在甜瓜中基因编辑靶点的快速鉴定，为研究甜瓜基因功能和遗传改良奠定基础。